細(xì)胞質(zhì)控品說明書6607077

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：細(xì)胞質(zhì)控品

英文名稱：Immuno-Trol Cells

【包裝規(guī)格】

60測試/盒

【預(yù)期用途】

本產(chǎn)品用于使用單克隆抗體試劑和流式細(xì)胞儀進(jìn)行免疫表型分析，細(xì)胞質(zhì)控品是一種經(jīng)過分析的可溶解全血質(zhì)量控 制產(chǎn)品。此產(chǎn)品作為陽性對照細(xì)胞，與全血樣品處理方式相同，可以檢驗(yàn)靶細(xì)胞染色、紅細(xì)胞溶解、以及用流式細(xì) 胞儀分析樣品時所用試劑的性能及方法。

使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行免疫表型分析涉及到在全血樣品中識別和計(jì)數(shù)靶細(xì)胞。在進(jìn)行流式細(xì)胞儀分析之前需將全血樣 品用單克隆抗體染色并將紅細(xì)胞溶解。為此需要一種陽性對照細(xì)胞，用于檢驗(yàn)試劑性能、樣品制備方法以及染色操 作步驟。 1,2在單克隆抗體反應(yīng)性、紅細(xì)胞溶解及流式細(xì)胞分析方面，陽性對照細(xì)胞應(yīng)能模擬全血樣品。IMMUNO-  TROL細(xì)胞是一 種經(jīng)過穩(wěn)定處理的人類紅細(xì)胞和白細(xì)胞（淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞）的液體制備物，具有人類 正常全血所具備的細(xì)胞溶解、光散射、抗原表達(dá)及抗體染色特性。

【檢驗(yàn)原理】

細(xì)胞質(zhì)控品包括兩種主要的細(xì)胞組分，即白細(xì)胞和紅細(xì)胞。白細(xì)胞的功能是作為IMMUNO-TROL細(xì)胞中的陽性細(xì)  胞組分，在靶細(xì)胞上具有結(jié)合于單克隆抗體試劑抗體組分的表面抗原。紅細(xì)胞的功能是作為IMMUNO-TROL細(xì)胞  中的可溶解組分。IMMUNO-TROL樣品首先用單克隆抗體試劑染色，然后將其溶解除去紅細(xì)胞。之后視需要加入  熒光球，以直接測定絕對計(jì)數(shù)。對經(jīng)過染色和溶解處理的IMMUNO-TROL樣品進(jìn)行流式細(xì)胞儀分析，即可測定靶  細(xì)胞的百分比和絕對計(jì)數(shù)。用IMMUNOPREP™ 試劑系統(tǒng)及Q-PREP™ 、MULTI-Q-PREP™ 或TQ-Prep™工作站 溶解紅細(xì)胞、用 COULTER CYTO-STAT® 、CYTO-STAT/ COULTER CLONE®、及 IOTEST®單克隆抗體試劑將 白細(xì)胞 表面抗原染色、用Flow-Count™熒光球直接測定絕對計(jì)數(shù)，即可在經(jīng)過確認(rèn)和標(biāo)準(zhǔn)化的COULTER®

EPICS™  XL™/XL-MCL™流式細(xì)胞儀上測定期望結(jié)果。

【主要組成成分】

本品是一種經(jīng)過穩(wěn)定處理的人類紅細(xì)胞和白細(xì)胞液體制備物，懸浮于包含BSA的穩(wěn)定液中。

注：BSA含量極少，且密封包裝，本品在運(yùn)輸、使用過程中對接觸者和環(huán)境是安全的。

【儲存條件及有效期】

2~8℃保存，有效期9個月。

此試劑不可在小瓶標(biāo)簽上的失效日期之后使用。開瓶后的試劑在2~8℃下可保持穩(wěn)定90天。使用后應(yīng)將試劑立即放 回2~8℃。不可冰凍。

生產(chǎn)日期和失效日期詳見標(biāo)簽。

【適用儀器】

適用于下列型號的流式細(xì)胞分析儀，如 FC500 、FC500MPL、EPICS XL/XL-MCL、Altra、Navios 、Moflo、 Gallios 、FACSCalibur、FACSCanto II、FACSAria系列、Influx、PAS-Ⅲ。

【樣本要求】

使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行免疫表型分析涉及到在全血樣品中識別和計(jì)數(shù)靶細(xì)胞。在進(jìn)行流式細(xì)胞儀分析之前需將全血樣 品用單克隆抗體染色并將紅細(xì)胞溶解。為此需要一種陽性對照細(xì)胞，用于檢驗(yàn)試劑性能、樣品制備方法以及染色操 作步驟。 1,2在單克隆抗體反應(yīng)性、紅細(xì)胞溶解及流式細(xì)胞分析方面，陽性對照細(xì)胞應(yīng)能模擬全血樣品。

【檢驗(yàn)方法】

1.  確認(rèn)流式細(xì)胞儀已根據(jù)廠商及本實(shí)驗(yàn)室規(guī)程正確地校準(zhǔn)和標(biāo)準(zhǔn)化。

2.  將對照試劑和抗體預(yù)溫至室溫。

3.  標(biāo)記準(zhǔn)備放用于試驗(yàn)樣品的抗體的試管。

4.  按建議的抗體染色規(guī)程，吸適量抗體放入已正確標(biāo)記的試管。

5.  以相似于處理全血樣本的方式，輕輕滾動/倒轉(zhuǎn)對照試劑，使之混合。

6.  向每個試管分裝100微升對照試劑。

7.  按抗體染色規(guī)程將抗體和對照保溫。

重要說明:  如果有試劑小滴殘留在試管頂部，必須將其清除。否則未溶解的紅細(xì)胞可能會污染最終樣品，導(dǎo)致 錯誤結(jié)果。可用棉簽將其擦掉。

8.  按樣品制備方法中的步驟溶解經(jīng)過染色的對照試劑。

注意: 如果使用Flow-Count熒光球，將Flow-Count熒光球小瓶渦旋混合后向每個要求絕對計(jì)數(shù)結(jié)果的試管中加 入100微升。

9.  按特定抗體試劑的分析規(guī)程，用流式細(xì)胞儀進(jìn)行樣品分析。選通群體示于期望結(jié)果表。

注意：如果使用 Flow-Count Fluorospheres，則必須在加入Flow-Count Fluorospheres后兩小時內(nèi)對制備好的 樣品進(jìn)行分析。

【陽性判斷值或者參考區(qū)間】

用COULTER EPICS XL/XL-MCL流式細(xì)胞儀IMMUNOPREP試劑系統(tǒng)、MULTI-Q-PREP或TQ-Prep工作站、

CYTO-STAT 、CYTO-STAT/COULTER CLONE或IOTEST抗體、以及在適用的情況下用Flow-Count熒光球， 對每個抗原測定平均值。在這些條件下，95%的測得值應(yīng)該落入標(biāo)明的期望范圍之內(nèi)。每個實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對每個  分析過的抗原建立其平均值和期望范圍。如果加入貝克曼庫爾特公司的實(shí)驗(yàn)室間質(zhì)量保證計(jì)劃（IQAP），此計(jì)劃 提供與其它實(shí)驗(yàn)室的數(shù)據(jù)比較，可以強(qiáng)化本實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量保證計(jì)劃。

重要須知：請勿將此質(zhì)控品與以下試劑一起使用：CYTO-STAT®/COULTER CLONE® CD3 ( IgG1)-FITC/B4-RD1 、CYTO-STAT®/COULTER CLONE® B4-FITC 和CYTO-STAT®/COULTER CLONE® B4-RD1。

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

如果無法得到預(yù)期的結(jié)果，或光散射或熒光性質(zhì)發(fā)生漂變，說明產(chǎn)品可能變質(zhì)。此外還應(yīng)檢查儀器的標(biāo)準(zhǔn)化、樣品 制備技術(shù)和試劑、抗體染色技術(shù)、以及抗體性能。溶血可能說明儲存條件不當(dāng)，也許會在細(xì)胞溶解力方面影響產(chǎn)品 性能。

圖1: 用IMMUNOPREP試劑系統(tǒng)和MULTI-Q-PREP工作站溶解、用COULTER EPICS XL/XL-MCL流式細(xì)胞儀分析 的IMMUNO-TROL細(xì)胞的一個代表性雙參數(shù)側(cè)向散射（SS）對前向散射（FS）直方圖

圖2: 用IMMUNOPREP試劑系統(tǒng)和MULTI-Q-PREP工作站溶解、用tetraONE™系統(tǒng)在COULTER   EPICSXL/XL- MCL流式細(xì)胞儀上分析的IMMUNO-TROL細(xì)胞的一個代表性雙參數(shù)CD45對側(cè)向散射（SS）直方圖。

圖3: 用CYTO-STAT/COULTER CLONE Mo2-RD1/KC56-FITC (CD14/CD45)單克隆抗體染色、用IMMUNOPREP 試劑系統(tǒng)和MULTI-Q-PREP工作站溶解、COULTER EPICS XL/XL-MCL 流式細(xì)胞儀分析的 IMMUNO-TROL 細(xì)胞 的一個代表性雙參數(shù)CD45對CD14直方圖。

圖4: 用CYTO-STAT tetraCHROME ™ CD45-FITC/CD4-RD1/CD8-ECD/CD3-PC5單克隆抗體染色、用

IMMUNOPREP試劑系統(tǒng)和MULTI-Q-PREP工作站溶解、用tetraONE™ 系統(tǒng)在COULTER EPICS XL/XL-MCL流式 細(xì)胞儀上分析的IMMUNO-TROL 細(xì)胞的一個代表性雙參數(shù)CD3對CD4直方圖。

【檢驗(yàn)方法的局限性】

1.  如果流式細(xì)胞儀沒有進(jìn)行適當(dāng)調(diào)準(zhǔn)或熒光標(biāo)準(zhǔn)化，或細(xì)胞群體選通設(shè)置不當(dāng)，可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

2.  如果使用的流式細(xì)胞儀、細(xì)胞溶解系統(tǒng)或抗體與測定期望結(jié)果時所用的不同，所得結(jié)果可能會落到期望范圍之 外。

【注意事項(xiàng)】

1.  這種試劑含有少于0.1%的疊氮化鈉。疊氮化鈉在酸性條件下產(chǎn)生疊氮酸，這是一種極為有毒的化合物。當(dāng)丟棄 疊氮化合物時，應(yīng)該用自來水將其沖走。建議采用上述措施是為了避免疊氮化合物在金屬管道中沉積，產(chǎn)生導(dǎo)致爆炸的 條件。如果接觸到皮膚或眼睛，要用大量的水沖洗。

2.  潛在生物學(xué)危險性物質(zhì)每一份用于制備此物質(zhì)的人類血液都經(jīng)過由美國食品和藥物管理局（FDA）批準(zhǔn)的方法  進(jìn)行試驗(yàn)，以檢測人類免疫缺陷病毒（HIV-1和HIV-2）抗體、丙型肝炎病毒（HCV）抗體、以及乙型肝炎病毒表面抗 原（HBsAg）抗體的存在、結(jié)果均為陰性（無可重復(fù)的反應(yīng)）。由于任何試驗(yàn)方法都不能完全排除HIV 、HCV、 乙型肝炎病毒（HBV）或其它感染因子存在的可能性，此樣本/試劑應(yīng)按美國國立衛(wèi)生研究院疾病控制中心1988 年出版的《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的生物學(xué)安全》手冊中建議用于所有具有潛在感染性的人類血清或血液 樣品的2級生物安全規(guī)程操作。

3.  切勿用嘴吸樣，并避免樣品與皮膚和黏膜接觸。

4.  不可將試劑冷凍。

5.  防止試劑被微生物污染，否則可能會導(dǎo)致錯誤結(jié)果。

6.  應(yīng)按優(yōu)良實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范（GLP）進(jìn)行此試劑的操作。